TriMethyl-Histone H3-K27 Rabbit Monoclonal Antibody (Q16695/P68431) for ChIP, CUT&Tag, WB

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: TriMethyl-Histone H3 (K27) 기능 및 위치

히스톤 H3은 H2A, H2B, H4와 함께 염색질의 기본 반복 단위인 뉴클레오솜을 형성하는 코어 히스톤 단백질입니다. 뉴클레오솜의 핵심 구성 요소로서, 히스톤 H3은 DNA를 감싸 염색질로 응축시키고 기저 유전 정보에 대한 접근을 조절합니다. 이 구조적 역할은 염색체 안정성 유지와 전사, DNA 복제, DNA 수리를 포함한 핵심 핵 과정 제어에 중요합니다.

히스톤 H3은 유연한 N-말단 꼬리에서 메틸화, 아세틸화, 인산화, 시트룰리네이션을 포함한 다양한 번역 후 변형(PTM)을 받습니다. 종종 "히스톤 코드"라고 불리는 이러한 변형은 염색질 구조와 기능을 역동적으로 조절합니다. 라이신 27의 특정 트라이메틸화(H3K27me3)는 폴리콤 억제 복합체 2(PRC2)에 의해 부착되고 유전자 침묵, X 염색체 불활성화, 발달 조절과 관련된 잘 규명된 억제 표지입니다.

H3.1 변이체(UniProt P68431)는 광범위하게 발현되며 체세포에서 히스톤 H3의 대부분을 구성하는 반면, H3.1t(H3-4, UniProt Q16695)는 주로 정세포에서 발현됩니다. 두 변이체 모두 핵과 염색체에 위치하여 뉴클레오솜 조립과 염색질 조직화에 참여합니다.

관련 참고문헌: UniProt Q16695, UniProt P68431

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원 정보: 이 항체는 인간 히스톤 H3의 라이신 27(K27)을 아우르는 합성 트라이메틸화 펩타이드에 대해 제작되었습니다. 이 설계는 H3K27me3 변형의 특이적 인식을 보장합니다. 다양한 메틸화 상태를 구별해야 하는 응용 분야의 경우, 펩타이드 경쟁 분석을 사용하여 특이성을 검증하십시오.
• 웨스턴 블롯(WB): 히스톤 H3의 예측 분자량은 약 15 kDa입니다. 최적의 분리를 위해 적절한 겔 농도(예: 15% SDS-PAGE)를 사용하십시오. 밴드 특이성을 확인하기 위해 양성 및 음성 대조군(예: H3K27me3를 감소시키기 위해 EZH2 억제제로 처리된 세포)을 포함하십시오.
• ChIP 및 CUT&Tag: 이 항체는 H3K27me3 분포를 전장 유전체 또는 특정 유전자좌에서 매핑하기 위한 염색질 면역침강 및 CUT&Tag 분석에 적합합니다. 각 염색질 입력량에 대한 항체 농도를 최적화하고 적절한 IgG 대조군을 포함하십시오.
• ELISA: 표준 곡선을 생성하기 위해 면역원 펩타이드를 양성 대조군으로 사용하십시오. 항체가 유사한 트라이메틸화 모티프를 포함하는 펩타이드와 교차 반응할 수 있음을 고려하고, 관련 샘플 시스템에서 검증하십시오.

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