후생유전학 연구 및 ChIP, WB, ELISA를 위한 TriMethyl-Histone H3-K4 (Q16695 / P68431) Rabbit Monoclonal Antibody

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Histone H3 기능 및 위치

• Histone H3는 뉴클레오솜의 핵심 구성 요소로, DNA를 염색질로 감싸고 압축하여 전사, 수리 및 복제 기계의 접근성을 제한합니다. 이는 번역 후 변형의 복잡한 배열("히스톤 코드")을 통해 염색체 안정성 유지 및 유전자 발현 조절에 중심적인 역할을 합니다. 관련 참고문헌: PMID:17194708
• 표준 H3.1 단백질(다중 HIST1H3 유전자에 의해 암호화됨, SWISS P68431)은 대부분의 세포 유형에서 복제 의존적으로 발현되는 반면, 고환 특이적 변이체 H3.1t (HIST3H3, SWISS Q16695)는 주로 고환 세포에서 발현됩니다. 둘 다 세포 분열 동안 핵에 위치하며 염색체와 연관됩니다. 관련 참고문헌: Gene/Protein specific; see UniProt Q16695/P68431
• 리신 4에서의 트라이메틸화(H3K4me3)는 활성 프로모터, 열린 염색질 구조 및 전사 개시와 관련된 중요한 후생유전학적 표지입니다. 이는 COMPASS-패밀리 메틸전이효소에 의해 부착되며 유전자 활성화를 촉진하는 판독 단백질에 의해 인식됩니다. 관련 참고문헌: PMID:16185088
• H3K4me3는 다른 히스톤 변형(예: 아세틸화, 인산화, 다른 잔기에서의 메틸화)과 공존 및 상호작용하여 염색질 상태를 미세 조정합니다. 이 표지의 조절 장애는 암, 발달 장애 및 면역 기능 장애와 관련이 있어 후생유전학 연구 및 IVD 개발에서 핵심 바이오마커가 되고 있습니다.

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원(K4 주변의 합성 트라이메틸화 펩타이드)은 H3K4me3 변형에 대한 높은 특이성을 부여하도록 설계되었습니다. 선택성을 확인하려면 펩타이드 경쟁 분석 또는 메틸기를 제거하는 히스톤 디메틸화효소(예: LSD1) 처리를 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯(WB)의 경우, 염기성 핵 단백질을 농축하는 히스톤 추출 프로토콜을 권장합니다. 예상 밴드는 ~15kDa입니다; H3K4me3-양성 대조군을 사용하여 밴드 동일성을 확인하십시오.
• 염색질 면역침강(ChIP)에서, qPCR을 통해 알려진 H3K4me3 표적 유전자(예: GAPDH 프로모터)에서의 농축을 검증하십시오. 배경을 평가하기 위해 적절한 IgG 대조군을 포함하십시오.
• 면역조직화학(IHC-P) 및 면역형광(IF/ICC)의 경우, 항원 회복 조건(pH 6 시트르산염 또는 pH 9 EDTA)이 염색에 영향을 미칠 수 있습니다. 양성 및 음성 조직에서 다양한 희석 배율을 테스트하십시오.
• 종 간의 높은 서열 보존성으로 인해 인간, 마우스, 래트 및 기타 척추동물과의 교차 반응성이 예상됩니다. 정량 분석 전에 특정 샘플 시스템에서 검출을 검증하십시오.

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