TriMethyl-Histone H3-K56 Rabbit Polyclonal Antibody (Q16695/P68431) for WB, IF/ICC, ELISA, ChIP-seq

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Histone H3 (H3.1/H3.1t) 기능 및 위치

• 히스톤 H3는 뉴클레오솜의 핵심 구성 요소로, DNA를 염색질로 감싸고 압축하여 DNA 접근성을 제한합니다. 전사 조절, DNA 수리, DNA 복제 및 염색체 안정성에 중심적인 역할을 합니다.
• DNA 접근성은 히스톤의 번역 후 변형(PTM)의 복잡한 집합체, 즉 히스톤 코드에 의해 조절됩니다. 이러한 PTM은 염색질 상태 변화와 유전자 발현 결과를 매개하는 효능 단백질에 의해 인식됩니다.
• 라이신 56의 트라이메틸화(K56me3)는 H3의 구상 도메인에 위치한 특정 PTM입니다. 이 변형은 뉴클레오솜 내 히스톤-DNA 상호작용에 영향을 미칠 수 있으며, DNA 손상 반응 및 복제 중 염색질 역학과 관련이 있습니다.
• 표준 히스톤 H3.1은 전반적으로 발현되는 반면, 변이체 H3.1t(H3-4/HIST3H3에 의해 인코딩됨)는 고환 특이적 발현을 보입니다.
• 두 이소형 모두 핵에 위치하며 염색체와 연관되어 있어, 염색질 조직화에서의 구조적 역할과 일치합니다.

관련 참고문헌:

• 질량 분석법에 의한 H3K56me3 동정 PMID:17194708
• EHMT2 (G9a)의 K56 메틸화에서의 역할 PMID:22387026
• 뉴클레오솜 코어 입자 구성 및 히스톤 변형 (리뷰) UniProt 항목

실험 지침 및 기술 팁

• 특히 복잡한 생물학적 샘플을 다룰 때, K56me3 표지에 대한 항체의 특이성을 확인하기 위해 트라이메틸화 및 비변형 K56 펩타이드를 모두 사용한 펩타이드 경쟁 분석법을 사용하는 것을 고려하십시오.
• 웨스턴 블롯의 경우, 관심 종의 핵 추출물을 사용하여 예상되는 15 kDa 분자량에서 관찰된 밴드를 검증하고, 적절한 로딩 대조군 및 분자량 마커를 포함시키십시오.
• ChIP-seq 실험에서는, 비특이적 농축을 배제하기 위해 비변형 펩타이드 또는 항체 차단 샘플을 사용한 대조군 반응을 포함시키십시오. 히스톤 H3의 높은 서열 보존성으로 인해 광범위한 종에 걸쳐 교차 반응성이 예측되지만, 대상 종에서의 실험적 검증이 권장됩니다.
• IF/ICC 응용의 경우, 신호의 공간적 위치를 확인하기 위해 염색질 또는 특정 핵 하부 구조의 마커와의 공동 염색을 고려하십시오.

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