TriMethyl-Histone H3-K64 (Q16695/P68431) Rabbit Polyclonal Antibody (WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA)

핵심 제품 사양 및 매개변수

생물학적 배경: 히스톤 H3 기능 및 위치

히스톤 H3는 염색질의 기본 반복 단위인 뉴클레오솜의 핵심 구성 요소입니다. 뉴클레오솜은 DNA를 감싸고 압축하여 전사, DNA 수리, DNA 복제 및 염색체 안정성 유지와 같은 과정에 필요한 세포 기계에 대한 접근성을 조절합니다. 따라서 히스톤은 게놈 조직 및 기능에서 중심적인 역할을 합니다. DNA 접근성은 히스톤 코드라고도 불리는 히스톤의 번역 후 변형 복합체와 뉴클레오솜 재구성 활동을 통해 동적으로 조절됩니다.

두 가지 아이소형은 Swiss-Prot 접근번호 Q16695와 P68431로 나타납니다. Q16695 (히스톤 H3.1t, H3t 또는 H3.4로도 알려짐)는 주로 정세관 세포에서 발현되는 고환 특이적 히스톤 H3 변이체로, 정자 형성 동안 염색질 재구성에 기여할 가능성이 있습니다. P68431 (히스톤 H3.1)은 널리 발현되며 S기 동안 새로 합성된 DNA에 증착되는 표준적, 복제 의존적 히스톤입니다. 두 아이소형은 광범위한 서열 상동성을 공유하며 메틸화, 아세틸화, 인산화 등을 포함한 다양한 PTM의 대상이 되어 염색질 구조와 기능을 조절합니다.

리신 64 (K64)의 트라이메틸화는 히스톤 H3 테일 내의 특정 후성유전학적 표지이지만, 그 정확한 생물학적 역할은 아직 밝혀지고 있습니다. 다른 히스톤 메틸화 사건과 마찬가지로, 이는 효과 단백질의 도킹 부위 역할을 하거나 염색질 압축을 변경함으로써 유전자 발현에 영향을 미치는 것으로 생각됩니다.

관련 참고문헌: UniProt Q16695, UniProt P68431.

실험 지침 및 기술 팁

• 사용된 면역원은 히스톤 H3의 리신 64 주변 영역에 해당하는 합성 트라이메틸화 펩타이드입니다 (NP_003520.1 기반). 이 설계는 이 잔기에서 트라이메틸화 상태를 특이적으로 인식할 수 있게 합니다.
• 웨스턴 블롯 (WB)의 경우, 인간, 쥐, 래트 또는 기타 척추동물 샘플의 전체 세포 용해물 사용을 고려하십시오. 예상 분자량 ~15 kDa은 환원 및 변성 조건에서 확인해야 합니다.
• 면역조직화학 (IHC-P)의 경우, 에피토프를 노출시키기 위해 항원 회복 방법 (예: 시트르산 완충액에서 열 유도 에피토프 회복)이 필요할 수 있습니다. H3.1t 아이소형의 고환 특이적 발현을 고려하여 양성 및 음성 대조 조직에서 염색을 검증하십시오.
• 면역형광 (IF/ICC)에서 최적의 고정 및 투과 조건은 경험적으로 결정해야 합니다. 넓게 예측된 교차 반응성으로 인해 이 항체는 다중 종 비교 연구에 적합합니다.
• ELISA의 경우, 이 항체는 트라이메틸화된 H3-K64 펩타이드 또는 재조합 단백질을 검출하는 데 사용할 수 있습니다. 비특이적 결합을 최소화하기 위해 적절한 차단 및 세척 단계를 보장하십시오.

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