Ubiquityl-Histone H2A-K119 (P04908/P0C0S8) Rabbit Polyclonal Antibody for WB and ELISA

핵심 제품 사양 및 파라미터

생물학적 배경: Histone H2A Type 1 기능 및 위치

히스톤 H2A 기능

히스톤 H2A는 뉴클레오솜의 핵심 구성 요소로, DNA를 염색질로 감싸고 응축합니다. 이 구조적 역할은 DNA 접근성을 제한하여 전사, DNA 복구, DNA 복제 및 염색체 안정성을 중앙에서 조절합니다. DNA 접근성은 "히스톤 코드"로 알려진 복잡한 번역 후 변형(PTM) 세트와 뉴클레오솜 재구성을 통해 조절됩니다.

세포 내 위치

히스톤 H2A는 주로 핵에 위치하며 염색체와 결합합니다.

번역 후 변형

히스톤 H2A는 아세틸화, 인산화, 시트룰리네이션 및 유비퀴틸레이션을 포함한 광범위한 PTM을 겪습니다. 특정 주석 처리된 변형에는 다음이 포함됩니다:

• Ser-2에서의 N-말단 아세틸화.
• RPS6KA5에 의한 Ser-2 인산화.
• Arg-4에서의 시트룰리네이션.
• 이 항체가 표적하는 잔기인 Lys-119에서는 하이드록시이소부틸화, 베타-하이드록시부틸화, 크로토닐화, 글루타릴화와 같은 여러 아실화가 확인되었습니다. UniProt의 키워드 "Ubl conjugation"은 이 부위에서 유비퀴틸레이션도 발생함을 뒷받침합니다.

관련 참고문헌: PMID:11709551, PMID:15823041, PMID:16457589, PMID:15010469, PMID:24681537, PMID:27105115, PMID:21925322, PMID:31542297

실험 지침 및 기술 팁

• 면역원은 인간 HIST1H2AB(UniProt P04908/P0C0S8)의 K119 주변 합성 유비퀴틸화 펩타이드입니다. 이 설계는 유비퀴틸화 형태에 대한 특이성을 시사합니다. 적절한 대조군(예: 변형되지 않은 펩타이드 또는 유비퀴틸레이션이 조절된 세포의 리세이트와 비교)을 사용하여 특이성을 확인하십시오.
• 웨스턴 블롯(WB)의 경우, 히스톤 단백질을 농축하기 위해 산 추출 프로토콜을 사용하여 히스톤을 추출하는 것을 고려하십시오. 예측된 변형되지 않은 분자량은 약 14kDa입니다. 유비퀴틸화는 ~8.5kDa를 추가하므로 약 23kDa 부근의 밴드가 관찰될 수 있습니다.
• ELISA의 경우, 직접 또는 샌드위치 형식을 사용할 수 있습니다. 항체 결합을 평가하기 위해 유비퀴틸화 펩타이드 또는 재조합 유비퀴틸화 히스톤 H2A를 코팅하는 것을 고려하십시오.
• 넓은 예측 교차 반응성(인간, 마우스, 래트 및 기타)을 고려할 때, 규모를 확대하기 전에 특정 샘플 시스템에서 항체를 검증하십시오.

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